序言
本实验是对医用产品公司的一次性医疗用品进行了辐射开运体育·（中国）有限公司官网剂量设定和验证。实验原理是基于ISO11137-2：2006的方法，即先对辐照前产品的初始污染菌进行测定，然后选择验证剂量。再用验证剂量对产品进行辐照，并测定辐照后存活微生物的样品件数，以此来确定所确定的验证剂量能够满足10-6的开运体育·（中国）有限公司官网保证水平。
试验前准备工作
一、样品
1样品：医用产品，三个批号。
2器具及试剂 2.1器材 试管 容量瓶
三角烧瓶 酒精灯 开运体育·（中国）有限公司官网剪刀、镊子 开运体育·（中国）有限公司官网平皿（9cm） 75％乙醇棉
开运体育·（中国）有限公司官网刻度吸管(1ml、5ml)
紫外可见分光光度计 立式压力蒸汽开运体育·（中国）有限公司官网器 电热鼓风干燥箱 酸度计 恒温培养箱 电热恒温水浴锅 生化培养箱 电热恒温干燥箱
2.2培养基及试剂： a)流体硫乙醇酸盐培养基 b)改良马丁培养基 c)营养琼脂培养基
2.3稀释液、冲洗液及其制备方法 a)质量浓度为9g/L的无菌氯化钠溶液
b)0.1％蛋白胨水溶液 取蛋白胨1.0g，加水1000ml，微温溶解，滤清，调节pH值至7.1±0.2，分装，开运体育·（中国）有限公司官网。
c)pH7.0氯化钠-蛋白胨缓冲液 取磷酸二氢钾3.56g、磷酸氢二钠7.23g、氯化钠4.30g、蛋白胨1.0g，加水1000ml，微温溶解，滤清，分装，开运体育·（中国）有限公司官网。 二、实验前准备 2.1培养基要求：
用于培养需（厌）气菌和真菌的培养基的制备、培养基灵敏度检查及其他各项要求应符合《中药典（二部）》附录中《无菌检查法》的规定。
培养基使用按中药典方生产的符合规定的脱水培养基。制备后采用验证合格的开运体育·（中国）有限公司官网程序开运体育·（中国）有限公司官网。制备好的培养基保存在2～25℃、避光的环境。
2.2器具开运体育·（中国）有限公司官网：与供试液接触的所有器具应采用可靠方法开运体育·（中国）有限公司官网，置压力蒸气开运体育·（中国）有限公司官网器内121℃30min，或置电热干燥箱内160℃2h。
2.3无菌室要求：无菌室操作台局部符合洁净度100单向流空气区域要求。无菌室在消毒处理完毕后，检查空气中的菌落数，方法如下：取直径约90mm培养皿数支，无菌操作注入融化的营养琼脂培养基约20mL，在30℃～35℃培养48h证明无菌后，取3只培养皿在无菌室操作台或超净工作台平均位置打开上盖，暴露30min后盖好，置30℃～35℃培养48h后取出检查，3只培养皿上生长的菌落数平均不得超过1个。
无菌试验过程中检查空气中的菌落数，方法同上。在试验开始进行时打开平皿盖，至试验结束盖好照上法培养，符合上述要求。 2.4阳性对照：
选择金黄色葡萄球菌为对照菌，接种金黄色葡萄球菌的新鲜培养物至营养琼脂培养基中，23～28℃培养24～48小时，将上述培养物用0.9%无菌氯化钠溶液制成每1ml含菌数小于100cfu的菌悬液。阳性对照试验的菌液制备方法验证试验，加菌量小于100cfu，供试品用量同供试品无菌检查每份培养基接种的样品量。阳性对照管培养48～72小时应生长良好。 2.5阴性对照：
取相同稀释液、冲洗液同上法操作，作为阴性对照。阴性对照不得有菌生长。方法
客户提供生产的医用产品，每件医用产品均是一个独立的单元产品，其样品份额为1。具体步骤如下：
1. 随机抽取连续三批常规生产的产品，每批10件，共30件做生物负载检测。另从其中一批随机取5件样品，做回收率实验。
2. 当每个批平均生物负载都不超过三批总平均生物负载的2倍时，根据三批的总平均负载的检测结果，选择开运体育·（中国）有限公司官网保证水平为10-2的开运体育·（中国）有限公司官网剂量作为验证剂量。
3. 对以上三批抽样产品连续生产的110件产品实施验证剂量，实际吸收剂量应在验证剂量的±3%之内。
4. 对用验证剂量辐照过的100件产品做无菌实验，其余的10件产品做无菌试验的验证实验。 5. 根据无菌实验的结果，确定验证剂量是否被接受，即确定的验证剂量是否能够满足10-6的开运体育·（中国）有限公司官网保证水平。
实施内容
一、回收率测定
取5ml洗脱液洗脱5支产品，分别洗脱四次，然后将样品用营养琼脂做琼脂覆盖，于37℃培养箱中，培养48±2h，记录结果并得出修正系数。 二、初始污染菌测定
